Bazele dihydromyricetinei

Dihidromiricetina este un inhibitor puternic de dihidropirimidază cu IC50 de 48 μM. Dihidromiricetina activează autofagia prin inhibarea semnalizării mTOR. Dihidromiricetina inhibă formarea complexului mTOR (mTORC1/2).

Țintă: Dihidropirimidinază: 48 μM (IC50); mTORC1; mTORC2; Autofagie

Studii in vitro: Dihidromiricetina, un flavonol, inhibă semnificativ activitatea catalitică a dihidropirimidazei față desubstratul natural dihidrouracil și substratul xenobiotic 5-propil-hidantoină. Dihidromiricetina a arătat un efect inhibitor semnificativ asupra activității dihidropirimidazei pe ambele substraturi, chiar mai mult decât miricetina. Valorile IC50 ale dihidromiricetinei pentru dihidropirimidază determinate utilizând curbele de titrare ale dihidrouracilului și 5-propilhidantoinei au fost 48±2 și, respectiv, 40±2 μM[1]. Suplimentarea cu dihidromiricetină (DHM) a inversat semnificativ creșterea fosforilării mTOR la ​​Ser2448 (p-mTOR) în timpul administrării D-gal, sugerând că dihidromiricetina poate activa autofagia prin inhibarea semnalizării mTOR.

Studiu in vivo: Grupul de control normal, grupul D-gal, grupul D-gal plus dihidromiricetină (100 mg/kg), grupul D-gal plus dihidromiricetină (200 mg/kg) au fost evaluate prin labirintul de apă Morris (MWM). capacitatea de învățare și memorie la șobolani) (n=10 per grup). Tratamentul cu dihydromyricetin (DHM) scurtează semnificativ latența de evadare în comparație cu grupul model indus de D-gal.

Solubilitate: In vitro: DMSO: Mai mare sau egal cu 100 mg/mL (312,26 mM), „Mai mare sau egal cu” înseamnă solubil, dar saturația este necunoscută. In vivo: 1. Adăugați fiecare solvent unul câte unul: 10 procente DMSO 90 procente (20 procente SBE- -CD în soluție salină) Solubilitate: mai mare sau egală cu 2,5 mg/ml (7,81 mM); soluție limpede 2. Se adaugă fiecare solvent unul câte unul: 10 procente DMSO 40 procente PEG300 5 procente Tween-80 45 procente Solubilitate salină: mai mare sau egală cu 2,5 mg/mL (7,81 mM); Soluție limpede 3. Se adaugă fiecare solvent unul câte unul: 10% DMSO 90% ulei de porumb Solubilitate: Mai mare sau egală cu 2,5 mg/mL (7,81 mM); soluție limpede.

Soluție stoc:

1 mM 3,1226 mL 15,6128 mL 31,2256 mL

5 mM 0,6245 mL 3,1226 mL 6,2451 mL

10 mM 0,3123 mL 1,5613 mL 3,1226 mL

Analiza kinazei: Testele spectrofotometrice rapide sunt utilizate pentru a determina activitățile enzimatice ale hidantoinazei, alantoinazei, dihidrotirozinazei și iminazei. S-au folosit ca substraturi dihidrouracil, {{0}}propil-hidantoina și ftalimidă. Dacă nu se specifică în mod explicit altfel, dihidrouracilul (2 mM) a fost utilizat ca substrat în testul standard pentru dihidropirimidază. Pe scurt, scăderea absorbanței la 230, 248 și 298 nm a fost măsurată prin hidroliza dihidrouracilului, 5-propil-hidantoinei și ftalimidei ca substraturi la 25 de grade, respectiv. Pentru a începe reacția, dihidropirimidaza purificată (10-70 ug) a fost adăugată la 2 ml dintr-o soluție care conține substrat și 100 mM Tris-HCI (pH 8.0 ). Hidroliza substratului a fost monitorizată cu un spectrofotometru UV/vis. Coeficientul de extincție al fiecărui substrat a fost determinat experimental prin măsurare directă cu un spectrofotometru. Coeficienții de extincție ai dihidrouracilului, 5-propil-hidantoinei și ftalimidei sunt 0,683 mM-1 cm{-1 la 230 nm, 0,0538 mM{-1 cm{-1 la 248 nm și 0,0538 mM-1 cm{-1 la 298 nm, respectiv la 3,12 mM-1cm{-1. Rata inițială de schimbare a fost o funcție a concentrației enzimei în intervalul de absorbanță de 0.01-0.18 min{-1. Unitatea de activitate este definită ca cantitatea de enzimă care catalizează hidroliza lui 1. μmol de substrat pe minut, iar activitatea specifică este exprimată în unități de activitate per mg de enzimă. Parametrii cinetici Km și Vmax au fost determinați din diagrame neliniare prin potrivirea ratelor de hidroliză din experimentele individuale la ecuația Michaelis-Menten.

Experimente celulare: Probele de țesut din hipocamp și cortical au fost lizate în tampon de liză care conține 20 mM Tris (pH 7,5), 135 mM NaCI, 2 mM EDTA, 2 mM DTT, 25 mM -glicerofosfat, 2 mM pirofosfat de sodiu, 10% pirofosfat de sodiu, 10% glicerol. Triton X Omogenizare. -100, 1 mM ortovanadat de sodiu, 10 mM NaF, 10 ug/mL aprotinină, 10 ug/mL leupeptină și 1 mM PMSF pe gheață timp de 30 de minute și centrifugate la 12000 xg, 4 grade timp de 30 de minute. Supernatantul a fost colectat și cuantificarea proteinelor a fost efectuată folosind kitul BCA. Probele de proteine ​​au fost fierte timp de 5 minute la 95 de grade în prezența tamponului de probă. Proteinele țintă au fost separate prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă cu dodecil sulfat de sodiu (SDS-PAGE), transferate pe membrane de nitroceluloză și testate cu anticorpi primari și secundari corespunzători. În cele din urmă, vizualizați proteina țintă prin expunerea la film cu raze X prin reactivi de chemiluminiscență îmbunătățită (ECL).

Experimente pe animale: Şobolani S-au folosit 40 de şobolani masculi Sprague-Dawley (SD) (vârsta: 8 săptămâni; greutate corporală: 160±20 g). Șobolanii au fost împărțiți aleatoriu în 4 grupuri, inclusiv grupul de control normal, grupul model D-gal și D-gal combinat cu DHM, cu doze de 100 și, respectiv, 200 mg/kg-zi, cu 10 șobolani în fiecare grup. Toți șobolanii au fost găzduiți într-un mediu cu temperatura camerei de 22 ± 2 grade și o fotoperioadă întunecată (12 ore: 12 ore) cu acces la hrană și apă ad libitum. După 1 săptămână de aclimatizare la noul mediu, șobolanii din grupul DHM au fost administrați prin gavaj cu dozele indicate de DHM dizolvate în apă distilată o dată pe zi la ora 8:00 timp de 6 săptămâni consecutive. Șobolanii din lotul de control normal au fost dozați cu apă distilată. Cu excepția grupului de control normal, șobolanii din alte grupuri au fost injectați subcutanat cu D-gal la o doză de 150 mg/kg.d timp de 6 săptămâni consecutive. Fiecare administrare de DHM trebuie să aibă loc cu 2 ore înainte de injectarea cu D-gal.

Livrare: temperatura camerei; poate varia

98 la sută

1. Livrare rapidă. Asigurarea calității

2. Echipa noastră de cercetare și dezvoltare este compusă din absolvenți post-doctorali, biologici și alimentar, cu capacități independente de cercetare și dezvoltare.

3. Oferiți servicii de ambalare personalizate. Serviciu OEM, inclusiv: gel moale, capsule, tablete, pliculețe, granule etc. Serviciu pentru producerea de produse specifice clientului cu peste 100 de clienți în întreaga lume.

4. Peste 10 ani de experiență în producția de plante medicinale conform standardului GMP. Experiență completă în controlul calității și aplicarea extractelor din plante.