Extract de frunze de Engelhardia Roxburghiana DHQproducător
Extract de frunze de Engelhardia Roxburghiana Dihidroquercetinăeste un compus dihidroflavonol care se găsește în multe plante. Pe lângă dihidroquercetina sintetică de pe piață, principala sursă naturală este zada. Compania noastră a descoperit prin cercetările asupra frunzelor de Astragalus membranaceus că frunzele naturale de Astragalus membranaceus conțin și dihidroquercetină. Pe măsură ce resursele de zada devin din ce în ce mai rare, descoperirea companiei noastre poate reduce foarte mult costul de producție al dihidroquercetinei și poate oferi cele mai rentabile produse de dihidroquercetină de pe piață.
Fiind cel mai mare producător de dihidroquercetină din China, KINTAI are două căi principale de proces pentru prepararea dihidroquercetinei: biosinteză și extracție. Dihidroquercetina pe care o producem în prezent este extrasă în principal din zada, iar unele sunt extrase din frunze de lup. Biosinteza este pe cale să intre în testul de producție pilot și, odată finalizată, vă va aduce produse de dihidroquercetină de înaltă calitate și ieftine. În cele ce urmează, prezentăm în principal procesul de extracție actual al companiei noastre folosind frunze de lup și metoda de sinteză a biosintezei. Dacă sunteți interesat de mai multe detalii, vă rugăm să ne contactați pentru mai multe răspunsuri profesionale.
KINTAI Procesul de extracție a dihidroquercetinei din frunzele de fructe de lup galbene
Producția noastră adoptă un proces în mai multe etape pentru a asigura puritatea și calitatea înaltă aExtract de frunze de Engelhardia Roxburghiana DHQ.
Prelucrarea materiilor prime: Selectați frunzele proaspete de pădure galbene, îndepărtați impuritățile și tăiați-le pentru a vă asigura că ingredientele active sunt complet eliberate în procesul de extracție ulterior.
Extracție și concentrare:Utilizați soluție de etanol 80% pentru două extracții de reflux. Adăugați de 6 ori cantitatea de etanol pentru prima dată și de 5 ori cantitatea de etanol pentru a doua oară pentru a asigura extragerea eficientă a ingredientelor active din frunzele de fructe de lup galbene. Extractul este concentrat sub presiune redusă pentru a elimina etanolul pentru a asigura siguranța produsului.
Purificare prin cromatografie pe coloană:Utilizați rășini de adsorbție macroporoase, cum ar fi D101, AB-8 și NKA-II pentru separare și purificare ulterioară. Procesul de eluare este bun, iar soluția de etanol 70% este utilizată pentru eluare. Extractul este transparent la culoare.
Cristalizare:Prin concentrarea precisă a solventului și procesul de răcire, sunt generate cristale de ace de dihidroquercetină galben deschis.
Hidroliză:Extractul este hidrolizat și recristalizat pentru a obține dihidroquercetină de înaltă puritate cu un conținut de 95,7%-96,5%.
Analiza cromatogramei HPLC
În timpul procesului de producție, toată dihidroquercetina este testată prin cromatografie lichidă de înaltă performanță pentru a asigura puritatea și eficiența ridicată a produsului. După cum se arată în figură, analiza precisă a cromatogramei HPLC arată conținutul de dihidroquercetină.
COARaport de analiză prin cromatografie lichidă al DHQ
Cele mai recente cercetări ale Kintai privind sinteza dihidroquercetinei
Echipa noastră de cercetare a făcut recent o descoperire importantă în studiul sintezei microbiene a dihidroquercetinei
Dihidroquercetina este un compus flavonoid important care este utilizat pe scară largă în alimentație, medicină și agricultură datorită activităților sale antioxidante, antiinflamatorii, antitumorale și alte activități fiziologice. Cu toate acestea, metodele tradiționale de extracție a plantelor sunt limitate de anotimpuri, de condițiile geografice și de aprovizionarea cu materii prime, rezultând costuri de producție ridicate și producție instabilă. Prin urmare, utilizarea microorganismelor pentru sinteza heterologă a dihidroquercetinei devine o opțiune atractivă.
Sinteza microbiană nu numai că poate evita aceste blocaje ale extracției plantelor, dar are și avantajele unui ciclu de producție scurt, cerințe de mediu scăzute și control al calității ușor. Cu toate acestea, din cauza limitărilor factorilor cum ar fi reglarea metabolică, modul de a realiza eficient sinteza dihidroquercetinei în microorganisme rămâne o provocare majoră. Prin screening-ul enzimelor cheie, ingineria promotorului, integrarea cu mai multe copii și reprogramarea metabolică, am îmbunătățit semnificativ producția de dihidroquercetină și am oferit o modalitate eficientă de producție industrială.
Screening-ul și optimizarea enzimelor cheie F3'H și F3H
Procesul de sinteză al dihidroquercetinei se bazează pe cataliza a două enzime cheie, F3'H și F3H. F3'H catalizează hidroxilarea (2S)-naringeninei în poziţia C-3' a scheletului flavonoid pentru a genera (2S)-eriodictiol; F3H transformă (2S)-naringenina în dihidrokaempferol. Pentru a îmbunătăți producția de dihidroquercetină, am analizat trei F3'H și cinci F3H din diferite plante. În urma experimentelor, s-a constatat că SmF3'H și CsF3H au avut cele mai bune efecte catalitice, producând (2S)-eriodictiol și dihidrokaempferol cu randamente de 254,1 mg/L și, respectiv, 173,4 mg/L. Prin urmare, am selectat aceste două enzime pentru optimizarea ulterioară a sintezei.
Optimizarea proiectelor promotor
Pentru a îmbunătăți și mai mult expresia SmF3'H și CsF3H, am introdus ingineria promotorului și am optimizat nivelurile de expresie ale acestor enzime cheie. Prin screeningul promotorilor de diferite puteri, s-a constatat că atunci când SmF3'H și SmCPR au fost exprimate sub controlul promotorilor PGAL1 și PGAL10, titrul de (2S)-eriodictiol a fost cel mai mare, ajungând la 382,1 mg/L. În mod similar, am crescut semnificativ producția de dihidrokaempferol prin reglarea expresiei CsF3H și folosind promotori de diferite forțe, cum ar fi PTDH1, PGAL7 și PSSA1. Această optimizare arată că prin creșterea nivelului de expresie al enzimelor cheie, eficiența sintezei metaboliților țintă poate fi îmbunătățită în mod eficient.
Integrarea cu mai multe copii îmbunătățește rezultatul
Pentru a îmbunătăți în continuare producția de dihidroquercetină, am adoptat tehnologia de integrare a genelor cu mai multe copii. Prin integrarea copiei genei a căii de sinteză a dihidroquercetinei în situsul multi-copie Ty2 al Saccharomyces cerevisiae, am obținut cu succes o tulpină FQ26ty cu producție mare, al cărei titru de dihidroquercetină a ajuns la 71,4 mg/L. Analiza cantitativă a genelor a arătat că numărul de copii ale genelor SmF3H, SmF3'H și SmCPR a variat între 2,87 și 3,44, ceea ce indică faptul că integrarea genelor cu mai multe copii a îmbunătățit semnificativ producția de dihidroquercetină. În plus, prin integrarea în continuare a mai multor copii ale genelor căii de sinteză, am construit seria tulpinii FQE-D și am crescut cu succes producția de dihidroquercetină la 74,5 mg/L. Acest rezultat demonstrează că creșterea numărului de copii ale genelor cheie ale căii sintetice este o strategie eficientă pentru a crește randamentul produselor țintă.
Reprogramarea metabolică și optimizarea metabolismului carbonului
Pe lângă optimizarea enzimelor cheie și a integrării genelor, am reprogramat metabolic și sistemul de metabolism al carbonului al Saccharomyces cerevisiae pentru a crește și mai mult producția de dihidroquercetină. În primul rând, am introdus gene legate de calea PAL, inclusiv AtPAL2, AtC4H, AtATR2 și ScCYB5, iar tulpina rezultată FQ27 a atins o producție de dihidroquercetină de 87,8 mg/L. Ulterior, am crescut și mai mult randamentul la 103,9 mg/L prin supraexprimarea genelor cheie ARO1/2/3 ale căii shikimate și a genei EcAROL derivată din E. coli. În plus, am introdus și o cale heterologă a fosfocetolazei pentru a conecta strâns metabolismul central al carbonului cu sinteza eritroz-4-fosfatului și apoi am obținut tulpina FQ29 cu o producție de dihidroquercetină de 107,5 mg/L.
Optimizarea aprovizionării cu NADPH și alfa-cetoglutarat
F3'H trebuie să consume NADPH în timpul procesului catalitic, în timp ce F3H necesită -ketoglutarat ca co-substrat. Prin urmare, pentru a crește oferta acestor două substanțe cheie, am supraexprimat gene precum TYR1 și ZWF1 pentru a crește oferta de NADPH. Experimentele arată că co-exprimarea TYR1 și a mutantului BDH1* crește producția de dihidroquercetină cu 20,2%, ajungând la 175,8 mg/L. În plus, supraexprimarea ARO8 a promovat și mai mult producția de -ketoglutarat, rezultând producția de dihidroquercetină atingând 206 mg/L. În cele din urmă, prin supraexprimarea IDH1, am obținut o tulpină cu randament mare FQ38 cu un randament de 235,1 mg/L.
Explorarea producției industrializate
Pe baza optimizării la scară de laborator, am efectuat în continuare experimente de fermentație alimentată într-un bioreactor de 5 L. Prin adăugarea a 5 g/L CaCO3 în timpul procesului de fermentație, am crescut cu succes titrul de dihidroquercetină la 873,1 mg/L în 114 ore, stabilind un nou record de producție.
În rezumat, am îmbunătățit semnificativ eficiența sintezei microbiene a dihidroquercetinei prin inginerie metabolică sistematică și optimizarea procesului de fermentație. Această cercetare nu oferă doar o bază tehnică pentru producția industrială a dihidroquercetinei, dar oferă și o referință pentru sinteza microbiană a altor metaboliți secundari ai plantelor.
Aplicații diverse
Suplimente alimentare
Alimente funcționale
Cosmetice
Colaborați cu noi pentru succes
Într-o epocă în care sănătatea și bunăstarea sunt în centrul atenției, DHQ este lider în căutarea longevității, vitalității și bunăstării generale. Fiind cel mai mare furnizor de extracte de zada DHQ din China, Kintai este partenerul dumneavoastră preferat pentru soluții naturale de înaltă calitate, care să vă susțină obiectivele de sănătate și bunăstare.Dacă doriți să cumpărați de înaltă calitateExtract de frunze de Engelhardia Roxburghiana, nu ezitați să ne contactați lasales@kintaibio.comsau feedback pe pagina următoare.
Tag-uri populare: extract de frunze de engelhardia roxburghiana, China engelhardia roxburghiana extract de frunze producători, furnizori, fabrică
